Come tradurre mRNA in proteina

I nostri geni codificano proteine ​​che vengono utilizzati nelle nostre cellule per svolgere funzioni quali il metabolismo energetico , la biosintesi e la divisione cellulare . Le proteine ​​sono costruite da aminoacidi uniti da legami peptidici . " Translation" è un processo mediante il quale un acido ribonucleico messaggero ( mRNA ) , che è sostanzialmente una copia del gene individuale , viene utilizzato come modello per costruire una proteina . In natura , traduzione della proteina accade all'interno di una cellula vivente , ma i biologi molecolari hanno imparato a fare le proteine ​​in laboratorio . Questa tecnica è utilizzata per la rapida identificazione dei prodotti genici , studi proteine ​​pieghevoli , studi di mutazione , e studies.Things funzionali che vi serve
Il tuo mRNA
coniglio lisato di reticolociti System
Amino Acid Mixture meno Metionina
amino Acid Mixture meno leucina
RNasin
Transcend tRNA
Pipette e suggerimenti
Microcentrifuge tubo

Mostra Altre istruzioni
1

Unire tutti i componenti in un provetta : Dispensare 35 microlitri Coniglio lisato di reticolociti di sistema , 0,5 microlitri di miscele di aminoacidi , 1 microlitro di RNasin , 2 microlitri di mRNA e 1 microlitro di tRNA insieme , e mescolare . Il Coniglio lisato di reticolociti di sistema include tutte le molecole che si trovano all'interno delle nostre cellule e necessari per la traduzione , compresi i ribosomi e fattori d'inizio . Questo passo sarà preparare tutto pronto per la traduzione . Your molecola di mRNA si attacca ad una ribosoma , ei fattori di iniziazione assemblare . Molecole chiamate tRNA sono associati con i loro aminoacidi e sono pronti a costruire la proteina .
2

Riscaldare la miscela di reazione a 30 gradi Celsius . La traduzione inizierà durante questa fase. Il messaggio nel mRNA viene "letta " dai tRNA . Ogni tRNA trasporta un aminoacido , e questi amminoacidi sono uniti insieme per formare le proteine ​​.
3

Attendere 90 minuti per la traduzione di procedere . I tRNA continuano portando nuovi amminoacidi secondo il messaggio mRNA . Una volta che l' mRNA è completamente lettura , la traduzione finisce e la proteina è pronta .
4

Purificare la vostra proteina mediante SDS - PAGE . E 'pronto per i test funzionali .