Come misurare la temperatura ottimale per un enzima

Un enzima è una proteina che catalizza ( aumenta il tasso di ) reazioni chimiche . La temperatura ottimale della maggior parte degli enzimi , o la temperatura alla quale gli enzimi meglio facilitare le reazioni , è tra 35 e 40 gradi Celsius . L'aumento della temperatura entro questa finestra aumenta la velocità di reazione , perché eccita le molecole e aumenta la velocità con cui enzimi /reagenti scontrano e reagiscono per fare il prodotto . Tuttavia , l'aumento della temperatura troppo può denaturare l'enzima e impedirgli di lavoro a tutti .

Determinare la temperatura ottimale enzima riscaldando la reazione importi infinitesmal e prendendo piccoli campioni della reazione , per determinare quando il tasso massimo di produzione occurs.Things prodotto che vi serve
enzimatico
substrato
kit di analisi per il prodotto
Scintillation flaconcino
Becher
piastra di riscaldamento
Termometro
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Selezionare un metodo. Determinare come si sta andando a misurare la concentrazione del prodotto in vari punti l'esperimento. Ad esempio , è possibile misurare la concentrazione di molti prodotti utilizzando uno spettrofotometro e calcolo della concentrazione della assorbanza , o misurando la fluorescenza e calcolando la concentrazione di fluorescenza .
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Imposta il tuo esperimento. Posizionare gli reagenti e enzima in un piccolo contenitore con un coperchio , come ad esempio una fiala di scintillazione . Reazione avrà inizio . Porre la fiala di scintillazione in una grande bicchiere di acqua a temperatura ambiente . Porre il becher su una piastra di riscaldamento . Collocare un termometro all'interno del bicchiere . Questo permette di misurare la temperatura della reazione in vari punti .
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Prendete un campione di 100 microlitri della reazione a temperatura ambiente , circa 25 gradi Celsius . Ruotare la piastra di riscaldamento acceso. A varie temperature tra i 30 ei 40 gradi Celsius ( 30,5 , 31 , 31,5 , ecc ) prendere 100 campioni microlitri della vostra reazione .
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Determinare la concentrazione del prodotto ad ogni temperatura . Quando la temperatura supera i 40 gradi Celsius , si vedrà una diminuzione del tasso al quale substrato viene convertito in prodotto , perché l'enzima viene denaturato . Il punto in cui il prodotto viene prodotta al tasso massimo è il punto in cui la temperatura è al livello ottimale .