Passi di Protein Purification

Ogni funzione in ogni organismo vivente è determinato dalla funzione delle sue proteine ​​. Purificare una proteina permette di cristallizzare la proteina pura per scoprire diverse sequenze di amminoacidi . Nelle scienze mediche , questo è un processo molto importante che isola e identifica quali la proteina sta facendo in qualsiasi processo biologico . Purificazione della proteina è prezioso anche per la scoperta e la comprensione delle relazioni evolutive tra organisms.Things che ti serviranno
proteine ​​Bio - Rad Assay Reagent
centrifuga
tubi centrifugazione
due sistemi cromatografici
2 Chromatogprahic pompe
Collector Fraction
spettrometro RS Components Buffer
dispositivo Filter
soluzioni SDS - page
Rifrattometro
Pippets
tubi collettore di frazioni
Pippet consigli
Concentratori tubi
Eppendorf

Mostra altre istruzioni
Ottenere Protein
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Condurre un test basato sulle differenze uniche nella proteina separato da altre proteine ​​. Questo test è chiamato " Assay" ed è necessario utilizzare quando trovare la proteina specifica .
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separare le diverse strutture della cella per avere la struttura che ha la più alta concentrazione della proteina particolare .
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Diminuire la densità della proteina per restringere la ricerca per la proteina esatta che stai cercando. Proteine ​​tutti variano in densità . Sviluppare un omogenato strappando la membrana cellulare mediante centrifugazione . Il materiale denso almeno , più lontano dal fondo della provetta da centrifuga , si chiama " surnatante " e deve essere ottenuta e rimesso nella centrifuga --- ma ad una velocità molto più veloce . Questo , a sua volta , crea un nuovo surnatante . Il processo ripetitivo di mettere il surnatante nella centrifuga è chiamato centrifugazione differenziale .
Purificare la proteina
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Una Aggiungere il sale alla proteina . Questo identifica diversi livelli di solubilità , che consente di isolare le diverse subunità e strutture .
5

utilizzano diversi tipi di cromatografia per isolare ulteriormente la più alta concentrazione della proteina . ( Vedi Risorse ).
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Utilizzare l'analisi SDS -PAGE per capire come precisa il piano di purificazione di proteine ​​era .