Semplice Modalità di versamento piastre di agar

piastre di agar sono componenti sperimentali standard utilizzati molto rapidamente in laboratori di biologia molecolare . Essi sono utilizzati per le colonie di coltura di microrganismi come batteri come E. coli . Ci sono molte varietà di piastre di agar , a seconda della specie di microrganismi di essere coltivati ​​e la presenza di modificazioni genetiche ( ad esempio la resistenza agli antibiotici ) . Pesare Ingredienti

Uso di un laboratorio bilancia , misurare Bacto - Tryptone ( 10g ) , estratto di lievito ( 5g ) , cloruro di sodio ( 5g ) e agar in laboratorio o di ricerca - grado. Utilizzando cilindri graduati o una pipetta di misurazione , misurare 1 ml di idrossido di sodio 1N . Manipolazione sterile non è richiesta , in modo che questi passaggi possono essere eseguite su un normale banco da laboratorio . Questa ricetta è un brodo Luria standard di base , normalmente usato per fare piastre di agar , e non contiene eventuali supplementi . Esistono altre varianti di questo brodo , ma quello corretto che sostiene la crescita del microrganismo specifico devono essere utilizzati .
Portare l' Agar

Aggiungere i reagenti in polvere in un 1l ( o più grande ) autoclavabile pallone a fondo piatto , quindi aggiungere l' idrossido di sodio . Rabboccare con acqua distillata sterile per fare un litro di miscela. Per 500ml di questo mezzo , aggiungere 7,5 g di agar e autoclave . Raffreddare in un bagnomaria regolato a 50 ° C. Da qui in poi, ogni passaggio deve essere eseguito in condizioni sterili , in modo da lavorare in una cappa di contenimento o sotto una fiamma . Se necessario aggiungere integratori come gli antibiotici o agenti di crescita , filtro - sterilizzare questi e quindi aggiungere ai media . Non aggiungere ai media che non è stato ancora raffreddate , come il calore distrugge gli integratori .
Preparare le piastre di Petri ( piastre )

Mentre il supporto si raffredda, impostare i piatti prendendoli dalla loro confezione ( manicotto ) , rimuovendo i loro coperchi ed etichettatura fondo delle piastre con il tipo di brodo ( media) nonché il supplemento che contiene. Inoltre , è essenziale scrivere la data della piastra è stato fatto , e il nome della persona che fa questo .
Versare il Agar

Mentre l' agar è fluido ( meglio tra 45 e 50 gradi C ) , usare guanti protettivi termici e versare circa 15 ml di brodo agar nel centro del piatto e permettere che questo raggiunga non più di qualche centimetro dalla parte superiore della piastra . Lasciare l' agar di diffondersi , ma non agitare le piastre o supporti troppo, come le bolle nel mezzo fluido si solidificano nella piastra di agar . Continuare a versare il resto delle tavole . Una volta versato , lasciare i coperchi dai piatti per consentire loro di solidificare , quindi sostituire il coperchio , girare i piatti a testa in giù su le palpebre , e impilare di nuovo nel loro imballaggio .