Come Expand approvate linee di cellule staminali

Tutti gli organismi pluricellulari contengono cellule staminali, che hanno la capacità , a differenza di altre cellule , di trasformarsi in cellule specializzate con caratteristiche coerenti con le cellule di vari tessuti , come le ossa, grasso , nervi e muscoli . Questa trasformazione è chiamato " differenziazione ".

Cellule staminali embrionali approvate per la ricerca finanziato dal governo federale derivano principalmente da embrioni coltivati ​​al di fuori del corpo , in una clinica di fecondazione in vitro . Questi embrioni vengono letteralmente sviluppati da fertilizzazione un uovo umano in una provetta . Le cellule staminali sono ottenute da embryo.Things coltivati ​​che ti serviranno
Vial di cellule staminali concentrate
staminali supporti cellulari
Incubator
cultura cappuccio Tissue
25 e 75 cm ^ 3 flaconcini
tripsina
PBS ( tampone fosfato )
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scongelare una fiala di cellule staminali , in cappa di coltura tissutale , per sfregamento tra le mani . Versare direttamente nel corso di un piatto di coltura ^ 3 cella di 25 cm contenente terreni di coltura . Agitare il piatto in una "figura 8" per ottimizzare la distribuzione uniforme delle celle .
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Guarda le celle il giorno dopo sotto un microscopio ottico per assicurare una distribuzione uniforme e l'espansione delle cellule . Celle formeranno colonie circolari tutto il piatto . Continuare a esaminare le cellule giornaliero fino a raggiungere la confluenza ( > copertura del 70 per cento di piatto ) .
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Controllo cellule staminali quotidianamente per garantire che essi non cominciano a proliferare , in quanto questo può causare loro di differenziare , e una volta che succede , non possono tornare al loro stato indifferenziato - intere linee di cellule staminali sono sprecati in questo modo . Il tasso di crescita delle cellule staminali dipende dal tipo di cellule staminali - cellule staminali umane possono prendere 10 ai 12 giorni per diventare adeguatamente confluenti , mentre alcuni tipi di cellule staminali animali possono crescere più rapidamente
4 < . p > dividere le celle , quando raggiungono la confluenza , in 75 cm ^ 3 piatti con 1-2 * 10 ^ 6 cellule /piatto . Cambia il supporto , almeno ogni tre giorni.
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Monitorare le cellule placcato e il passaggio (divisione) li in più piatti prima che raggiungano la confluenza a garantire la salute a lungo termine delle cellule ed evitare di differenziazione.