I ricci di mare sono un gruppo eterogeneo di invertebrati acquatici . Sono ideali per esperimenti di fertilizzazione a causa delle grandi dimensioni dei loro gameti e la facilità con cui possono essere raccolti . Quando imparare a conoscere ricci di mare fecondazione , iniziare con un esperimento di fertilizzazione semplice osservazione , per poi passare agli esperimenti di manipolazione . Raccolta Sea Urchin Gameti
E ‘ relativamente semplice per raccogliere le uova di riccio di mare e sperma .
Per indurre il rilascio di gameti , iniettare 1 ml di 0,5 M KCl intorno alla bocca del riccio . Posizionare la bocca riccio maschio giù in una piastra di Petri vuota pulito e posizionare il riccio bocca femminile giù sopra un piccolo bicchiere con acqua di mare artificiale a 57,2 gradi Fahrenheit .
Dopo pochi minuti , i ricci inizieranno a rilasciare i loro gameti .
coprire ermeticamente la piastra di Petri di sperma e metterlo in una ciotola di ghiaccio .
Dopo le uova si depositano sul fondo del bicchiere , versare delicatamente l’acqua di mare artificiale e sostituirlo con fresca acqua di mare artificiale della stessa temperatura .
lo sperma può essere conservato per un massimo di due settimane, ma le uova deve essere usato lo stesso giorno in cui sono stati raccolti .
Preparare i gameti per la fecondazione
per rendere più semplice la fecondazione , lavare il cappotto gelatina dalle uova . Li Bagnare con acqua di mare artificiale fino a quando le uova si depositano sul fondo , quindi versare l’acqua . Ripetere questa operazione per quattro volte . Trasferire le uova a un diverso bicchiere riempito con 10 ml di acqua di mare artificiale . Consentire loro di stabilirsi .
Usando una micropipetta , trasferimento 50 ul di sperma in una provetta . Diluire lo sperma con 5 ml di acqua di mare artificiale . Mescolare agitando delicatamente il tubo . Aggiungere 0,1 ml di questo sperma diluito nel becher contenente le uova .
Osservare Fecondazione
Utilizzare una diapositiva depressione riempita con la soluzione di gameti per osservare la fecondazione sotto un microscopio .
si noti che poco dopo un ovulo è fecondato , una busta fecondazione comincia a formarsi .
Manipolazione fecondazione
è possibile eseguire diverse ulteriori esperimenti .
per un esperimento di diluizione degli spermatozoi , usano diverse concentrazioni di spermatozoi per fecondare le uova . Osservare i risultati sotto il microscopio
Condurre un esperimento di inquinamento : . . Tentativo fecondazione in un ambiente di mare artificiale contaminati da sostanze inquinanti quali candeggina e detergenti
Modificare il pH dell’ambiente fecondazione con gocce di acido cloridrico .