La composti chimici cetiltrimetilammonio bromuro , esadeciltrimetilammonio bromuro , bromuro cetrimonio e bromuro palmityltrimethylammonium sono tutti variamente noto come CTAB . Il prodotto chimico è usato come un tampone di estrazione nel genoma – sequenziamento del DNA , in particolare dalle piante . CTAB Buffer Ricette
Le quantità delle varie sostanze chimiche in ricette per tampone CTAB differiscono da laboratorio . Tuttavia , tutti comprendono gli ingredienti 1 M Tris HCl pH 8.0 , 0.5 M EDTA , 5 M NaCl e H2O ( talvolta bidistillata ) . Per la componente CTAB , alcuni laboratori utilizzano cetiltrimetilammonio bromuro , e alcuni bromuro uso esadeciltrimetilammonio .
Tessuto vegetale Preparazione
Preparazione del tessuto vegetale può variare a seconda del materiale . Pareti delle cellule e le membrane devono essere ripartite per accedere al materiale nucleare senza alcuna degradazione . Di solito , macinare il materiale vegetale con azoto liquido consente l’accesso al DNA , mantenendo enzimi cellulari nocivi e sostanze chimiche inattiva .
Sospensione e centrifugazione
Il tessuto terreno è sospese nel tampone CTAB e mettere in un bagno di acqua circolante . Successivamente, esso viene miscelato con cloroformio e centrifugata per separare le proteine solubili e altro materiale . DNA viene quindi precipitato dalla fase acquosa e accuratamente lavata per rimuovere i sali contaminanti . Il DNA purificato viene quindi sospesa e conservato in tampone TE o acqua distillata sterile .