? Quando si studia la genetica , l’elettroforesi su gel è uno strumento essenziale del ricercatore genetico . Studenti e ricercatori utilizzano attrezzature elettroforesi su gel di stimare o verificare le dimensioni coppia di base di un campione di DNA o per purificare un campione di DNA . DNA a doppio filamento è costituito da coppie di basi nucleotidiche . La dimensione di un frammento di DNA è descritto da come può basare coppie lungo frammento che è , ad esempio 50 coppie di basi o 100 paia di basi . Incontra l’apparecchiatura

gel elettroforesi composto da un vassoio , colata pettini, box gel , alimentazione , gel di agarosio e box luce UV . Il vassoio di colata e di dialogo gel sono realizzati sia plexiglass o Teflon , entrambi i quali sono materiali non conduttivi . Quando una corrente elettrica viene fatta passare dalla rete elettrica tramite un tampone contenuto nella scatola gel , la corrente non trasferisce dalla casella gel nella ricercatore . Il vassoio di colata e pettini sono utilizzati per creare il gel . Vassoi Casting disponibili in varie dimensioni , come fanno i pettini . Una piccola gel può essere utilizzato per eseguire cinque o sei campioni mentre un gran gel può eseguire fino a 20 campioni . Il ricercatore utilizza la casella di luce UV in combinazione con un colorante luminescenti per leggere i risultati di un esperimento di elettroforesi .

Agarose Gel

Il gel utilizzato in elettroforesi è fatta da una soluzione riscaldata di agarosio e buffer che viene poi versato in un vassoio di fusione con pettini di fusione ad una estremità . Una volta fredda , l’agarosio polimerizza , trasformandosi in un gel poroso simile a Jello solo più pesante e robusto. Dopo il ricercatore pone il gel nella casella gel e copre con tampone , i campioni di DNA vengono miscelati con un colorante luminescente noto come etidio bromuro e un addensante . L’ addensante consente il campione a depositarsi sul fondo del pozzo , invece di galleggiare fuori nella soluzione . La concentrazione di agarosio , in soluzione , determina la dimensione di frammenti di DNA che possono muoversi attraverso il gel e quanto rapidamente . La maggior parte dei laboratori utilizzano un gel di agarosio 0,8 per cento in grado di separare frammenti di DNA di 500 paia di basi a 20.000 . Il pettine fusione crea piccoli pozzi in una delle estremità del gel .

Il processo

DNA è una molecola con carica negativa . Quando l’alimentazione è collegato alla scatola gel , l’elettrodo negativo è posto sullo stesso lato come il campione di DNA , mentre l’elettrodo positivo è posto all’estremità opposta della scatola gel . Come la corrente scorre attraverso la soluzione tampone , il campione di DNA è attratto alla corrente positivo . Più lunga è la corrente scorre attraverso il buffer , più il campione di DNA con movimento attraverso il gel . Se un campione contiene due o più dimensioni del frammento , i tempi di esecuzione più lungo mostrerà una maggiore separazione tra le due bande.

Il Risultato

Per leggere i risultati , l’ gel viene posto su una scatola di luce UV . La luce UV provoca il bromuro di etidio collegato ai frammenti di DNA a brillare come una fascia lineare . Il più brillante e più spesso la banda , il più DNA contenuto nel campione . Quando viene caricato il campione di DNA con un campione contenente diverse dimensioni frammento noti , lo scienziato può stimare la dimensione approssimativa del frammento di DNA . Se lo scienziato sta tentando di separare una particolare dimensione del frammento da un campione misto , si può asportare il gel intorno alla band ed estrarre il DNA più tardi .