La colorazione di Gram è un metodo di colorazione differenziale usato in ambito laboratorio di microbiologia clinica per identificare i batteri che possiede una membrana cellulare esterna di spessore o di una membrana cellulare esterna sottile . Le soluzioni chimiche utilizzate nella colorazione di Gram vi permetterà di identificare se un batterio è Gram positivi (membrana spessa cellulare) o Gram negativi ( membrana cellulare sottile) . Sapere se i batteri è Gram positivi o Gram negativi vi permetterà di determinare le specie di batteri , caratteristiche della malattia i batteri cause e gli antibiotici necessari per uccidere i bacteria.Things che ti serviranno

becco Bunsen

Rack

microscopio pre – pulite scivola

campione batteriche

soluzione viola cristallo

acqua distillata

una soluzione di iodio di Gram

Acetone

soluzione per colorazione alla safranina

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1

calore fissare i batteri su un vetrino . Trasferire i batteri da un campione esemplare raccolto con un tampone sterile o ansa da inoculo . Stendere i batteri su un vetrino pre- pulito . Riscaldare il vetrino su una fiamma del bruciatore Bunsen per alcuni secondi per apporre i batteri alla diapositiva. Porre il vetrino su un rack sopra un lavandino .

2

Versate cinque a 10 gocce di soluzione di cristallo violetto al vetrino e attendere per circa un minuto . Questo si macchia viola batteri .

3

Sciacquare il vetrino off con acqua distillata . Versare 5-10 gocce di soluzione di iodio di Gram sulla diapositiva e attendere un minuto . Una soluzione di iodio del Gram appone la macchia di cristallo violetto ai batteri se i batteri ha una membrana cellulare di spessore .

4

Sciacquare soluzione di iodio del Gram off con acqua distillata . Versate cinque a 10 gocce di acetone e attendere circa 10 secondi . L’ acetone rimuove macchie di cristallo violetto dai batteri con pareti cellulari sottili , ma non rimuovere la soluzione di cristallo violetto dai batteri con pareti cellulari spesse .

5

Versare cinque a 10 gocce di soluzione di safranina contrasto sul vetro scorrere e attendere un minuto . Il safranin si macchia la parete cellulare dei batteri rossi se la macchia di cristallo violetto è stato rimosso con acetone .

6

Sciacquare la soluzione di safranina con acqua distillata . Un sottile – cellule a pareti batteri manterranno la soluzione di safranina . A spessore -CELL a parete batteri conservano ancora la macchia di cristallo viola, quindi la soluzione di safranina saranno risciacquato .

7

Posizionare il vetrino sotto il microscopio in olio da immersione e osservare i batteri . Batteri Gram-positivi appariranno viola mentre i batteri Gram- negativi apparirà rosso .