? DNA ricombinante è il prodotto di combinare il DNA di due organismi diversi . Gli enzimi di restrizione sono enzimi batterici che catalizzano la scissione della molecola di DNA e sono comunemente usati nel processo di produzione di DNA ricombinante . DNA da un organismo viene introdotto nel genoma di un altro organismo, che provoca un genoma ricombinante che esprimono proteine da entrambi i microrganismi . Trasformazione batterica è spesso utilizzato nella produzione di DNA ricombinante . Il processo prevede quattro passaggi chiave . Isolare DNA
DNA deve essere isolato dal donatore e il vettore .
Il primo passo è quello di isolare vettore e il DNA del donatore . Se il donatore è un batterio , il principale DNA genomico sarà isolato . Se si tratta di un eucariote , il DNA nucleare è isolato . Il DNA vettore è comunemente un plasmide batterico . Plasmidi devono essere separati da batterico DNA genomico; questo è comunemente fatto per centrifugazione .
taglio DNA
enzimi di restrizione sono usati per tagliare il DNA in frammenti .
enzimi di restrizione sono prodotti da batteri per proteggere contro l’infezione da virus . Questi enzimi agiscono come forbici , tagliare il DNA in sequenze nucleotidiche bersaglio . Enzimi di restrizione del DNA tagliato in frammenti abbastanza piccoli per essere usato nella clonazione con estremità appiccicose che permettono l’adesione del vettore e il DNA del donatore .
Partecipare DNA
Illustrazioni DNA e DNA del donatore sono uniti mescolando .
Il donatore e il vettore di DNA sono combinati . Un enzima DNA ligasi legherà le estremità appiccicose del donatore e il vettore DNA creando legami fosfodiestere tra le dorsali fosfato dei due tipi di DNA .
Amplificazione del DNA ricombinante
DNA ricombinante molecole sono talvolta replicati in un ospite batterico .
il vettore plasmidico contenente il DNA donatore può immettere una cellula batterica attraverso semplice trasformazione . Trasformazione avviene quando una cellula batterica riprende DNA dall’ambiente e lo inserisce nel genoma dell’ospite . Quindi , il vettore , insieme con il DNA donatore , verrà replicato dalla cellula batterica insieme con il suo genoma . In questo modo , il DNA ricombinante viene amplificato .