cromatografia su strato sottile ( TLC) è un metodo per determinare l’identità e la quantità di sostanze sconosciute in una miscela . Si basa sul principio che ogni sostanza ha un peso molecolare unica e dimensione che determina la distanza che viaggia per capillarità attraverso una fase stazionaria . Nel caso di TLC , la fase stazionaria è un sottile strato assorbente , applicato ad una lastra di vetro , metallo o plastica . Una soluzione di molti composti – come soluzione di buccia d’arancia preparata – può essere separato per rivelare ogni componente che utilizza questo method.Things che vi serve

sottile cromatografia su strato piatto

grande bicchiere

lamina di stagno

Micropipette

Righello

Matita

notebook Lab

soluzione buccia d’arancia

soluzioni di composti carbonilici singoli

soluzione di sviluppo

mostrare Altre istruzioni

Performing cromatografia su strato sottile

1 Crea la linea visibile ma attenzione a non premere troppo difficile come questo può perforare la piastra TLC .

disegnare una linea retta di circa 1 cm sopra la base della piastra TLC con la matita e righello .

2 Lasciare spazio sufficiente tra le zone al fine di garantire che i campioni non si mescolano .

Segna “zone piatte ” lungo questa linea con una matita . Assicurarsi che vi sia almeno 1 cm di spazio tra ogni zona punto .

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Numero zone piatte sulla piastra TLC con una matita . Posizionare i numeri sotto la linea di matita . Questo impedisce la contaminazione del campione .

4 Controllare sul piatto spesso per evitare sopra essiccamento .

Asciugare la lastra in un forno preriscaldato a 50 gradi Celsius per 20 minuti.

5 E può essere utile per creare un diagramma della piastra TLC e la posizione di tutte le soluzioni per consultazione futura .

Utilizzare micropipette applicare piccoli campioni della soluzione buccia d’arancia e diverse soluzioni carbonilici noto alle zone piatte . Applicare ogni soluzione con un nuovo , pulito , micropipetta asciutto per evitare la contaminazione . Applicare una soluzione diversa in ogni zona punto . Disegnare con cura ed etichettare ogni applicazione in un quaderno di laboratorio .

Ad esempio, la zona 1 = methanal , Zona soluzione 2 = buccia d’arancia , zona 3 = propanale .

6

Lasciare il posto soluzioni per asciugare .

7 Per garantire una perfetta tenuta , arricciare i bordi della pellicola di copertura sotto il bordo del bicchiere .

Versare la soluzione in via di sviluppo in un grande bicchiere fino a quando la soluzione è 5 mm in profondità . Mettere un coperchio stagnola stretto sopra il bicchiere per evitare che la soluzione di sviluppo di evaporare .

8 Fare molta attenzione quando si inserisce la piastra TLC .

Inserire delicatamente la piastra TLC nel bicchiere , toccando solo i bordi di piastra. Re- coprire il bicchiere con il tappo stagnola e lasciare che la piastra di sviluppare .

9 Poiché molte soluzioni in via di sviluppo sono dannosi , asciugare la piastra in una cappa chiusa .

Rimuovere la piastra TLC quando la linea di soluzione di sviluppo è di circa 1 cm dalla parte superiore della piastra . Segna questa linea con la matita e righello . Sia la piastra TLC asciutto .

10 Conservare il pannello originale, perché si può avere a portata di mano con il tuo rapporto di laboratorio .

Rivelare le macchie sulla piastra TLC passando la lastra sotto luce UV o di riporla in una camera con pochi cristalli di iodio . Leggermente delineare ogni punto con una matita . Disegnare un secondo diagramma della piastra nel tuo quaderno , notando la dimensione e la posizione di ogni spot.

Identificare composti su una piastra TLC

11 Se è possibile , stimare la distanza due punti decimali .

Misurare dalla linea a matita in basso al centro di ogni spot con il righello . Registrare la distanza di ogni punto ha viaggiato nel tuo quaderno di laboratorio .

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Misurare la distanza tra le linee a matita . Record questa misura nel vostro quaderno di laboratorio .

13 Ogni spot deve avere un proprio valore Rf .

Calcolare il valore Rf per un posto dividendo la distanza del punto percorsa dalla distanza tra le due linee a matita .

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Confrontare i valori Rf delle macchie buccia d’arancia ai luoghi carbonile conosciuti . I punti che hanno gli stessi valori di Rf sono partite .