L’analisi del DNA coinvolge diversi tipi di esperimenti molecolari e procedure biologiche . DNA è una materia prima fragile e complicato, quindi la manipolazione e l’analisi richiede la migliore qualità e più pura preparazione di prodotti chimici . In base all’analisi , centinaia di sostanze chimiche , da soluzioni acide e basiche a buffer e coloranti , sono coinvolti nello studio del DNA . Capire perché vengono utilizzate alcune sostanze chimiche è la chiave per eseguire esperimenti di successo e ottenere risultati accurati , affidabili e riproducibili . Etilendiamminatetraacetato per DNA Purification
Tre tipi di DNA sono purificati per il lavoro scientifico : il DNA dal genoma ( DNA genomico ) , l’intero DNA della cellula ( DNA totale) o da plasmidi , che può autonomi moltiplicarsi. Totale purificazione del DNA cella utilizza sostanze chimiche che consentono la distruzione di numerose membrane di una cellula durante la lisi cellulare . Il etilendiamminatetraacetato chimica ( EDTA ) è spesso utilizzato per togliere gli ioni di magnesio , che sono necessari per mantenere la rigidità delle pareti cellulari , causando questi per indebolire al punto che collassano o strappo , rilasciando il contenuto della cella e il DNA per l’analisi. Inoltre , EDTA protegge e preserva l’integrità del DNA inibendo enzimi che sono normalmente presenti nella cellula , che può frammentare il DNA e di renderlo inutilizzabile .
Magneisum cloruro di amplificazione del DNA
La reazione a catena della polimerasi ( PCR ) è un metodo di analisi sofisticato utilizzato per amplificare diverse migliaia di copie di una molecola di DNA , tuttavia, è pieno di problemi tecnici e imprecisioni . Molti scienziati , dunque , di routine eseguire diversi insiemi differenti di PCR per trovare la condizione più ottimale e parametri di un particolare gene di interesse . Un chimico utilizzato per effettuare tale ottimizzazione è magnesio , che stabilizza l’enzima DNA polimerasi utilizzata in PCR e agisce come un co-fattore essenziale per l’ attività dell’enzima . Per la PCR , il magnesio viene utilizzato sotto forma di un buffer di cloruro di magnesio .
Bromuro di etidio per DNA colorazione
etidio bromuro è un colorante che si lega al DNA scivolando tra i nucleotidi che costituiscono un DNA a doppia elica in un processo noto come intercalazione . Questo colorante può essere illuminato con una lampada ultravioletta , in modo che il DNA a cui il bromuro di etidio è stata consolidata può essere visualizzato . Tuttavia , è richiesto almeno 1 nanogrammo di DNA per il bromuro di etidio per essere visto correttamente , quindi, è un modo di rilevare DNA PCR – amplificato . Anche se a buon mercato e ampiamente utilizzato , è anche un prodotto chimico mutageno conosciuto per causare il cancro , quindi il suo uso nei laboratori è fortemente regolamentata e molti scienziati si stanno muovendo per utilizzare alternative meno tossiche .