Un protocollo proteina sovraespressione si riferisce a qualsiasi metodo per ottenere un organismo per fare una proteina desiderata in quantità sufficiente per ulteriore studio . Gli scienziati usano spesso batteri e lieviti per rendere la loro specifica proteina di interesse , ma in teoria qualsiasi organismo potrebbe funzionare . Importanza
Al fine di studiare la struttura o la funzione di una proteina particolare , è necessario disporre di un ingente quantitativo disponibile per i test desiderati. Alcune proteine naturalmente presenti in grandi quantità e purificano facilmente dal loro organismo ospite . La maggior parte delle proteine , tuttavia , si verificano in quantità molto piccole o si verificano negli organismi dai quali proteine non possono essere facilmente purificati . Protocolli di proteine iperespressione generano grandi quantità di proteine desiderate di approfondimento , permettendo agli scienziati di studiare bassa quantità , proteine rari, tossici e persino mutati.
Protein Expression
Comune organismi utilizzati in protocolli overespressione includono batteri o lieviti . Gli scienziati ingegnere questi organismi per trasportare un gene che codifica per una proteina desiderata . Hanno posto il gene sotto il controllo specifico in modo che l’organismo non esprime o rendere la proteina desiderata fino specificamente indotto in modo . Ad esempio , gli scienziati possono progettare un organismo per trasportare un gene sotto il controllo diretto di uno zucchero specifico . In assenza di tale specifica zucchero , l’ organismo cresce ma non può fare la proteina . In presenza di zucchero , l’organismo farà un sacco di proteine.
Considerazioni
Molti protocolli iperespressione diverse di lavoro, ma deve essere ottimizzata per una proteina e specifico organismo . Ottimizzazione solito richiede tentativi ed errori e spesso dipende dalla struttura e la funzione della proteina . Sovraespressione di alcune proteine può uccidere l’organismo rendendo la proteina . In questo caso , potrebbe essere necessario attendere fino a che la popolazione dell’organismo cresce abbastanza grande prima di indurre la produzione di quella proteina . Modifica organismi o cambiare i tipi dello stesso organismo può anche aiutare .