cromatografia liquida ad alte prestazioni , o HPLC , è un metodo comune di analisi chimica strumentale . Il metodo prevede l’iniezione di un campione liquido in un apparecchio HPLC , dove viene trasportato da un flusso di solvente e separato nei suoi componenti chimici che si muove attraverso una colonna impaccata . L’identità e la quantità di ogni sostanza chimica vengono calcolati da una risposta del rivelatore . Al fine di validare uno strumento HPLC e accertarsi che funzioni correttamente , verificare ogni componente per function.Things corrette che ti serviranno

strumento HPLC con pompa , autocampionatore , colonna, del rivelatore e il computer di acquisizione dati

campione di controllo standard

Due solventi fase mobile

cilindro graduato

Cronometro

Weigh Scale

Calculator

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convalida di HPLC Instrumentation

1

impostare la pompa ad una portata nominale fase mobile ( per esempio , 2 millilitri al minuto ) . Posizionare la linea di uscita del solvente in un cilindro graduato . Avviare il cronometro e consentire alla pompa di funzionare per un determinato periodo di tempo . Leggere il volume di solvente nel cilindro graduato . Il volume raccolto deve essere uguale alla portata moltiplicata per il periodo di tempo per dimostrare la programmazione portata della pompa è in funzione .

2

Impostare la pompa per produrre un determinato rapporto tra i due solventi fase mobile . Posizionare la linea di uscita del solvente in un pre- pesato cilindro graduato e consentire alla pompa di funzionare fino a 50 a 100 millilitri di raccogliere solvente. Leggere il volume esatto di solvente nel cilindro e poi pesare il cilindro con il solvente . Calcolare il peso di solvente erogato . Dal peso e le rispettive densità dei due solventi puri , calcolare il rapporto di solventi erogato all’interno del cilindro . Questo rapporto deve essere uguale al rapporto programmato nella pompa HPLC .

3

Caricare un campione di controllo standard al campionatore e impostarlo effettuare almeno dieci iniezioni ripetute dello standard . Il campione controllo dovrebbe contenere una specifica sostanza chimica che il rilevatore HPLC risponde e la concentrazione del prodotto chimico nel campione dovrebbe essere noto . Per ogni iniezione , registrare l’uscita del rivelatore compreso il tempo di ritenzione dell’analita e la risposta del rivelatore (altezza o area del picco ) . Calcolare la media e deviazione standard per tutti i tempi decina di ritenzione e le risposte . Verificare che la deviazione standard in ogni caso è piccolo rispetto al valore assoluto del tempo e rilevatore di risposta medio ritenzione . Questo vi permetterà di convalidare la precisione del campionatore , colonna e rivelatore.