colorazione negativa in microscopia elettronica a trasmissione è una procedura utile nel visualizzare strutture molto fini in un campione. E ‘generalmente utilizzato per esaminare macromolecole quali proteine ​​cellulari, membrane cellulari , virus e singoli organelli cellulari . In questo metodo , una macchia metallo pesante si deposita attorno al campione da osservare . Una macchia negativa ideale è quella che non si lega fortemente con la distorsione campione causando di caratteristiche strutturali . Le soluzioni di uranile acetato

Uranly acetato con un pH compreso tra 4.2 e 4.5 sono utili in colorazione diversi tipi di campioni microbici con una buona risoluzione. Una soluzione 1 a 3 per cento viene preparato , filtrato utilizzando un filtro da 0,22 micron , e conservato a 4 ° C al buio . Se conservato in questo modo , la macchia mantiene per almeno un anno . Acetato di uranile dà un buon contrasto dell’immagine e produce un’immagine a grana fine che aiuta a visualizzare piccole particelle con maggiore chiarezza . Anche se questa soluzione può essere utilizzata anche con i virus , non dovrebbe essere utilizzato con campioni che non tollerano condizioni acide .

Acido fosfotungstico e suoi sali

una soluzione neutra di acido fosfotungstico ad una concentrazione di 1 a 3 per cento è utile quando la colorazione virus che sono instabili in condizioni acide. Potassio e di sodio di acido fosfotungstico sono spesso utilizzati perché la loro attività non è influenzata da formulazioni mezzi biologici . Tuttavia , questi sali possono danneggiare alcuni virus e la loro reazione con lipoproteine ​​della parete cellulare può causare un aspetto di fibre sottili .

Ammonio Molibdato

ammonio molibdato è usato in colorazione organismi che sono sensibili alle variazioni di pressione osmotica . Una soluzione neutra ad una concentrazione tra 1 a 2 per cento è utilizzato nella maggior parte dei casi . Tuttavia , occorre prestare attenzione per evitare di pH aumento superiore a 7,0 perché porta alla cristallizzazione del molibdato di ammonio che interferisce con la visualizzazione di esemplari .

Metilammina Tungstate

acido fosfotungstico e suoi sali di sodio e di potassio tendono a danneggiare alcune strutture fragili dei provini che macchiano . Questo effetto può essere evitato utilizzando metilammina tungstato come agente di colorazione negativa per fornire ragionevolmente buona risoluzione . Una soluzione di 2 – cento ad un pH di 6,5 è generalmente utilizzato . Lo svantaggio di usare questa macchia è che dovrebbe essere preparata prima di ogni colorazione perché degrada molto velocemente in deposito .

Stains negativi rari

Stains come uranile ossalato , formiato e solfato , oro thioglucose , zirconio sodico e formiato di alluminio sono macchie negativi che vengono talvolta utilizzati per macchiare alcuni campioni con requisiti specifici .