Come risolvere un virus su vetrini per microscopio

Virologia è lo studio dei virus . I virus sono così piccoli che devono essere visti al microscopio elettronico . Colorazione negativa deve essere utilizzato per visualizzare i virus, tessuti o cellule con un microscopio elettronico . Si utilizzerà lo stesso tipo di fissare protocolli se si sta utilizzando un microscopio elettronico a scansione o di un microscopio elettronico a trasmissione . La glutaraldeide è il fissativo primario più comunemente usato in microscopia elettronica . Un protocollo può essere utilizzato per esaminare un singolo virus e per contare la quantità di virus present.Things Hai bisogno
2 tubi Eppendorf
Formaldeide
glutaraldeide
acqua deionizzata
pipetta
tubi pipette
PH metro
idrossido di sodio
2 per cento acquosa di acido fosfotungstico
Virus sospensione
Etanolamina
fosfato sodio soluzione salina tamponata
Electron sfere microscopia lattice ( opzionale)
Laboratorio -grade acqua distillata
sieroalbumina bovina
griglia microscopio elettronico
filtro di carta
casella della griglia Laboratorio

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pipette di grado 1 Laboratorio di misurare delle quantità di liquido appunto .

Raffreddare tutti i prodotti chimici con un uso generale frigorifero laboratorio fissato a 4 gradi centigradi . Fai la tua fissativo in una provetta Eppendorf con l'aggiunta di 10 per cento di formaldeide e glutaraldeide 5 per cento di acqua deionizzata . Mescolare accuratamente con la vostra pipetta .
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Preparare 1N NaOH con l'aggiunta di 40.00 g di idrossido di sodio all'acqua distillata laboratorio per fare una quantità di 1 litro . Preparare la soluzione colorante utilizzando una pipetta per aggiungere la soluzione 1N NaOH a 10 microlitri (UL) del 2 per cento di acido fosfotungstico acquosa fino ad ottenere un pH di 7,3 . Misurare il pH con un pHmetro da laboratorio .
3 segnano sempre le provette con un pennarello permanant prima dell'uso .

Aggiungere 100 ul di sospensione di virus in una provetta Eppendorf , misurando con una pipetta . Fissare la sospensione virus con l'aggiunta di 10 ul del 10 per cento e il 5 per cento di formaldeide fissativo glutaraldeide .
4 sfere in lattice forniscono un punto di riferimento , mentre il conteggio dei virus .

Combina in una provetta Eppendorf 10 ul di sospensione di virus , 10 ul di sfere di lattice e 10 ul di acqua distillata contenente BSA 1 per cento , o albumina sierica bovina . Lasciare fuori le sfere in lattice , se non avete bisogno di contare i virus . Pipettare la soluzione 30 volte , usando la tecnica leggera corrente per evitare di danneggiare i virus .
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Applicare la soluzione alla griglia microscopio elettronico , e lasciare per 30 secondi a un minuto . Usare un pezzo di carta da filtro per disegnare liquidi in eccesso fuori dal lato . Volete un film sottile e uniforme.
6 microscopi ottici usano diapositive , ma microscopi elettronici utilizzano una griglia .

Aggiungi da 6 a 10 ul del 2 per cento di acido fosfotungstico acquosa immediatamente alla rete microscopio . Lasciare agire per 30 secondi , e poi disegnare fuori con un pezzo di carta da filtro . Assicurare una pellicola forme mentre si disegna fuori la soluzione .
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Posizionare la griglia nella casella della griglia , e permettere la diapositiva asciugare per diverse ore o durante la notte . Le vostre virus sono ora in grado di essere visto .
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