Demeriti del Metodo Plate Count

Nel metodo di conteggio piastra , una coltura microbica viene introdotto in un mezzo nutriente . Dopo un periodo di incubazione , ciascuna cellula microbica divide per formare una colonia visibile come una piccola zona . Queste cellule sono chiamate unità formanti colonie ( CFU ) e un conteggio di queste zone fornisce informazioni sulla carica microbica del campione . Anche se questo metodo è importante perché determina solo il numero di organismi vitali , ma ha anche alcuni svantaggi . Necessità di pretrattamento

Se piastra direttamente una coltura batterica , il numero di cellule che crescono sulla piastra sono troppo grandi per consentire il conteggio . Pertanto, è importante utilizzare un processo di diluizione seriale per assicurare che il numero di colonie sulla piastra è di circa 300 a 500 . In alcuni casi , come campioni di acqua altamente purificata , ci possono essere troppo pochi organismi presenti nel campione . Questi campioni devono essere concentrate prima di essere placcato per il conteggio.
Condizioni di crescita insufficienti

La piastra offre un mezzo nutritivo per la crescita di microrganismi striate su di esso . Tutti gli organismi ricevono quindi le stesse sostanze nutrienti . Anche se questo va bene per le culture che consistono di un unico organismo , si pone un problema in caso di colture miste . I diversi organismi presenti all'interno di una cultura mista possono differire quantitativamente e qualitativamente le loro esigenze nutrizionali. Quando tale coltura cresce , le cellule che non ricevono un'alimentazione sufficiente non crescono e si moltiplicano . Pertanto, anche se gli organismi sono presenti nella cultura , i loro numeri non riflettono la conta in piastra .
Errore di campionamento

L'accuratezza della conta in piastra dipende da una distribuzione uniforme di organismi sulla superficie della piastra di agar . Se queste cellule sono distribuite in modo non uniforme sulla superficie , provoca errori nel conteggio ottenuto . Ad esempio , in alcune specie , microrganismi possono verificarsi cellule non come singoli , ma come raggruppamenti, coppie , o pacchetti . Pertanto , l'assunzione del tenore di germi che ogni colonia è sorto da una singola cellula è errata e la popolazione stimata di organismi è molto meno rispetto ai veri livelli .

Metodo errori

Prima di placcatura , la coltura è reso sufficientemente diluire per consentire l'isolamento di celle separate sulla piastra . Un errore in questo processo di diluizione ha un impatto importante sul finale tenore di germi vitali . La temperatura di incubazione e tempo sono fattori critici perché gli organismi differiscono nella loro temperatura di incubazione ottimale e periodo . Nel caso di colture miste , dove c'è una grande differenza in questi valori attraverso organismi , non ci può essere insufficiente crescita di una specie particolare, comportando un errore .
In termini di tempo

Dopo la placcatura la cultura, le piastre di agar vengono incubate per consentire colonie di sviluppare . Questo periodo di incubazione può variare da giorni a settimane a seconda della natura degli organismi . In alcuni casi , i risultati ottenuti al termine di questo periodo possono essere di nessun valore pratico . Ad esempio, utilizzando conta su piastra per il monitoraggio ambientale in una sterile parenterale unità di produzione non ha benefici in tempo reale, anche se è di valore nel monitoraggio delle tendenze in carica microbica della zona .