Metodo tampone per il recupero Coliformi

Il metodo tampone può essere usato per recuperare coliformi ( a forma di bastoncino , Gram negativi, non formano spore di batteri che possono produrre gas quando la fermentazione del lattosio ) . Presenza di coliformi è un buon indicatore di batteri patogeni all'interno di un campione . Durano un po 'di più in campioni solidi e liquidi di batteri patogeni e possono essere facilmente identificati attraverso le loro caratteristiche . Di solito si trovano solo nei tratti intestinali umani e animali , non negli alimenti , suolo o acqua . Uno dei più noti è coliformi E. coli.There sono tre prove per determinare il conteggio dei coliformi : presunti , ha confermato e completato . Raccolta dei possibili Coliformi
tamponi sterili possono essere utilizzati per raccogliere eventuali coliformi da campioni solidi , come il cibo .

Per i campioni più solidi, come gli alimenti , tamponi sono un ottimo strumento per il recupero di eventuali coliformi sul campione . Il tampone può essere inserita nel campione alimentare direttamente o il campione può essere macinato prima tampone . Per la prova presuntiva , il tampone viene posto in una provetta contenente brodo lattosio e un tubo di Durham . Solitamente questa prova viene eseguita in triplicato , cioè tre tamponi saranno utilizzati sul campione e posti in singoli tubi . Per testare i liquidi , pipettando una certa quantità del campione nel tubo viene preferito il metodo tampone .
Presunto test

La prova presuntiva cerca la presenza di gas nel tubo . Poiché le possibili coliformi abbattere , il gas lattosio viene ceduto come un prodotto - e è intrappolato all'interno del tubo di Durham . Assenza di gas indica non ci sono coliformi presenti nel campione esaminato . Un risultato positivo sarebbe bolle di gas dopo 24 ore di incubazione ; se bolle di gas sono visibili solo dopo 48 ore , questo è considerato un risultato positivo dubbia . Il gas non può essere causa di coliformi e sono necessari ulteriori test .
Confermato
Su un piatto di EMB , la crescita batterica verde brillante è un forte indicatore di E. coli .

Una piastra eosina blu di metilene ( EMB ) è striato di entrambi i brodi positivi dubbi positivo e dalla prova presuntiva . Un piatto EMB negativo avrà colonie rosa e può indicare che il gas visto nella prova presuntiva non era dovuto coliformi ma altri tipi di batteri . Un piatto EMB positivo avrà colonie verdi viola o lucido ; questo conferma che i coliformi possono essere nel campione .
Completato

colonie dalla piastra EMB positivo vengono raccolte e coltivate in brodo lattosio nonché su un pendio di agar nutriente . Il test Completato doublechecks i risultati dei brodi lattosio precedenti . Dopo una incubazione di 24 ore , i batteri dalla slant agar nutriente vengono testate in base alla colorazione di Gram . Se i batteri sono Gram - che sarà rosa ; se sono Gram + appariranno viola . Se i microrganismi presenti sono Gram - , hanno una forma un'asta quando guardò sotto un microscopio , e ha anche prodotto il gas nel brodo lattosio, poi il recupero di coliformi era successo

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