Come misurare il pH in lattasi Labs

La lattasi è un enzima che scompone lo zucchero lattosio in glucosio e galattosio nel piccolo intestino , reni e fegato . Un test enzima lattasi è un esperimento di laboratorio di biochimica standard di primo anno. Parte di questo laboratorio prevede la misura dell'efficienza di lattasi a vari livelli di pH per determinare il pH ideale . È possibile eseguire questa mescolando diverse soluzioni tampone con una quantità misurata di lattasi e il suo substrato , quindi registrando l'efficienza della lattasi in un spectrophotometer.Things che ti serviranno Pennarello
7 cuvette spettrofotometro
3,5 ml di ONPG ( sostituto lattosio )
4,5 ml di ogni soluzione tampone : pH 2 , 4 , 6 , 7 , 8 , 10 , 12
Pipettes
spettrofotometro
penna a sfera
book Lab

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pH della soluzione di lattosio
1 non segnano la finestra della cuvetta di misura . Questo rovina l'esperimento .

Label sette cuvette per numero con il pennarello .
2 ONPG è un sostituto lattosio. E 'il subtrate di questa reazione enzimatica .

Aggiungere 0,5 ml di ONPG ad ogni cuvetta utilizzando un pipetta pulito e asciutto.
3 Prendere appunti attenti nel tuo libro laboratorio .

Aggiungere 4,5 ml di ciascuna soluzione tampone in cuvette separati . Ad esempio : aggiungere la soluzione tampone a pH 2 nella cuvetta # 1 . Aggiungere la soluzione tampone a pH 4 per cuvetta # 2 . Continuare in questo modo fino a quando tutte le cuvette sono riempiti . Utilizzare una pipetta diverso per ogni soluzione tampone per evitare la contaminazione . Apporre il numero cuvetta e il pH della soluzione tampone che contiene nel suo libro laboratorio .
4 Spostare il più velocemente possibile .

Usando una pipetta pulita , asciutta , aggiungere rapidamente 0,4 ml di enzima lattasi ad ogni cuvetta .
5 Work in fretta . La reazione è già iniziato .

Mettere le cuvette nello spettrofotometro , chiudere il coperchio ed eseguire il test del pH . I risultati del test vi dirà il pH ideale per una reazione di lattasi .