Trypan blu è un metodo biologico per quantificare la vitalità delle cellule , o per separare le cellule vive dalle cellule morte dopo di loro crescono in media. Molte cellule animali hanno bisogno di essere coltivate su una superficie , come un microveicolo , che è un polimero spherelike unicamente progettata per facilitare l’applicazione . Trypan blu colorazione non ha alcun effetto sulle perline , ma facilita la separazione del materiale di rivestimento da cellule non vitali . Microcarrier protocollo

Secondo la pubblicazione GE Healthcare ” Cell Culture Microcarrier , ” un campione di coltura di cellule coltivate su microveicoli viene posto in una provetta e permesso di stabilirsi . Il mezzo viene travasato e sostituito con una soluzione di calcio e tripsina . La provetta viene incubata sotto agitazione , i microveicoli sono lasciato depositare e il fluido è trasferito ad un secondo tubo . Microveicoli nel primo tubo vengono lavate , poi sommati con il supernatante dal secondo tubo . La sospensione viene centrifugata , o centrifugata e il supernatante viene scartato . Trypan blu macchia è aggiunto a segnare a cellule morte e fragements cellulari , e conta delle cellule vitali può essere fatto .

Colture cellulari endoteliali

L’aggiunta di microveicoli per colture cellulari è importante per lo studio della biologia delle cellule endoteliali , secondo uno studio prima descrivere questo processo nel numero di febbraio 1984 del ” Laboratory Investigation “. I ricercatori hanno suggerito un metodo per la selezione di cellule endoteliali da colture cellulari misto mediante microcarriers in una tecnica di trasferimento migrazione . Brevemente , microveicoli sono stati aggiunti alle colture cellulari come un quadro , in cui le cellule possono moltiplicarsi . Per separare le cellule , è stato aggiunto macchia trypan blu . La macchia non ha allegato ai talloni microcarrier e fece la selezione di celle possibili . Inoltre , gli autori hanno scoperto che trypan blu macchia montato solamente su cellule morte e frammenti cellulari . Quindi , le cellule che non macchiano erano vitali .

Identificazione della vitalità cellulare

Un articolo apparso nel numero di dicembre 1995 di ” Istochimica e Biologia Cellulare ” descritto un nuovo sistema per identificare le cellule coinvolte nell’angiogenesi , che è la creazione di nuovi vasi sanguigni come visto nella formazione del tumore . I ricercatori hanno sviluppato un sistema di coltivazione basato microcarrier che utilizza trypan colorazione blu. Questo processo ha permesso ai ricercatori di osservare le caratteristiche di crescita di diversi tipi di cellule . Trypan blu colorazione migliorata solo l’osservazione e non ha avuto alcun effetto sui microveicoli .

Diversi media

Uno studio nel numero di marzo 2001 di ” Cytotechnology ” dettagliato l’ caratterizzazione della crescita cellulare e la morte in due tipi di media che usano microveicoli e trypan colorazione blu . I risultati di questo studio indicano che trypan colorazione blu è stata ottenuta utilizzando entrambi i supporti . Lo studio ha concluso che trypan colorazione blu e l’uso di microcarriers non potrebbero accertare se la morte cellulare è dovuta ad apoptosi , o morte cellulare geneticamente programmata , o necrosi , che descrive la morte del tessuto con altri mezzi .