Un singolo filamento di DNA contiene tutte le informazioni genetiche espresso da un organismo vivente . DNA ricombinante , d’altra parte , si riferisce a due filamenti di DNA da due organismi diversi stati combinati insieme per creare un nuovo filamento di DNA . Molti scienziati studiano il DNA ricombinante per contribuire a rendere le scoperte che potrebbero avanzare il progresso dell’agricoltura , medicina e terapia genica . Gli scienziati impiegano tre fasi generali per la produzione di DNA ricombinante . Isolamento
La prima fase di produzione di DNA ricombinante è quello di selezionare un filamento di DNA da inserire nel vettore . Il vettore è una molecola di DNA indipendente che gli scienziati usano solo come un vaso di trasferire nuovo materiale genetico in un’altra cella . Il filamento di DNA che lo scienziato sceglie di iniettare nel vettore dipende da che tipo di cellula sarebbe più appropriata per il rispettivo progetto scientifico , ma i fili sono di solito da una cellula batterica o di un gene umano .
Vettore
l’obiettivo della seconda fase è quello di preparare il vettore per il processo di formazione ricombinante . Questa fase prevede il taglio di un pezzo di DNA con un enzima di restrizione , legando il filamento di DNA e inserendo il filo nel vettore con DNA ligasi . Solitamente l’inserto contiene anche un marcatore definitivo per consentire agli scienziati di distinguere più facilmente , e identificare le molecole ricombinanti durante la trasformazione . Esistono molti marcatori differenti , e ogni marcatore produce effetti diversi . Così, gli scienziati possono selezionare un marcatore che è appropriato per il particolare studio condotto .
Formazione
La fase finale prevede lo scienziato inserendo il vettore in un ospitare cellulare che è stato preparato con cura per accettare il DNA estraneo . La cellula ospite può essere una cellula batteri come E. coli . Poiché il DNA ricombinante è formato , lo scienziato incuba il vettore e il DNA ospite insieme in ciò che è noto come il processo di trasformazione . Utilizzando i marcatori , lo scienziato in grado di identificare quali cellule hanno preso il DNA estraneo .
Metodi
Il metodo di trasformazione si riferisce alla formazione di DNA ricombinante utilizzando una cellula batterica – E. coli – come una cellula ospite . Tuttavia, altri metodi di formare DNA ricombinante utilizzano gli stessi passaggi , ma non utilizzano cellule batteriche per le cellule ospiti . Per esempio , la trasformazione nonbacterial offre gli stessi passi del metodo di trasformazione ma con una cella non batterica che serve come la cellula ospite . Le cellule umane sono tipicamente utilizzati per l’ingegneria genetica o progetti di ricerca di clonazione . Inoltre , l’introduzione fago , o il processo di trasfezione , è un equivalente del metodo di trasformazione , tranne un fago viene utilizzato come cellula ospite , invece di batteri .